制備色譜是指采用色譜技術(shù)制備純物質(zhì)，即分離、收集一種或多種色譜純物質(zhì)。制備色譜中的“制備”這一概念是指獲得足夠量的單一化合物，以滿足研究和其他用途。制備色譜技術(shù)則是用于分離提取天然產(chǎn)物有效成分的一種重要技術(shù)。

　　業(yè)內(nèi)人士表示，制備色譜技術(shù)的出現(xiàn)使色譜技術(shù)與經(jīng)濟(jì)利益建立了聯(lián)系，其已經(jīng)成為現(xiàn)代科學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐中分離多組分化合物的一個(gè)重要技術(shù)手段，尤其是在自然界中天然產(chǎn)物活性成分的提取和純化中起著重要作用。

　　在制備色譜技術(shù)中，薄層色譜技術(shù)屬于液相色譜技術(shù)的范疇，經(jīng)典的制備型薄層色譜設(shè)備簡(jiǎn)單，投資較少，但處理量較小，通常用來(lái)分離毫克級(jí)的樣品，且被分離的化合物需要從薄層板上刮下，并將其從吸附劑中提取出來(lái)。

　　常壓柱色譜應(yīng)用較為廣泛，技術(shù)也相對(duì)成熟。主要包括吸附柱色譜、分配柱色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜、干柱色譜等。其中，吸附柱色譜中的硅膠吸附柱色譜是目前應(yīng)用較為廣泛的一種常壓柱色譜。

　　加壓制備色譜技術(shù)是一種使用較為廣泛的色譜分離純化技術(shù)，它是將分離填料填裝在色譜柱內(nèi)，用液體流動(dòng)相進(jìn)行洗脫，利用藥物中不同活性成分與填料相互作用力的差異來(lái)分離混合物。

　　高速逆流色譜是逆流色譜中最具實(shí)用意義的一類，高速逆流色譜分離柱的固定相無(wú)載體，消除了載體對(duì)分離過(guò)程的影響，適合分離極性物質(zhì)和具有生物活性的物質(zhì)，且高速逆流色譜超載能力強(qiáng)，進(jìn)樣量大，尤其適用于制備性分離，并同時(shí)具備高回收率。

　　模擬移動(dòng)床色譜技術(shù)主要應(yīng)用于石油化學(xué)工業(yè)，超臨界流體色譜則是對(duì)氣相色譜和高效液相色譜的補(bǔ)充，是根據(jù)待測(cè)物在固定相和流動(dòng)相兩相中的分配系數(shù)不同，繼而實(shí)現(xiàn)對(duì)待測(cè)物的先后洗脫。

　　對(duì)于制備色譜技術(shù)，很多用戶也有許多疑問(wèn)。比如做柱層析時(shí)(國(guó)產(chǎn)大孔吸附樹(shù)脂)，怎么才能把洗脫液中的樹(shù)脂殘留物處理干凈?

　　專家認(rèn)為，大孔吸附樹(shù)脂在使用前，一般需要進(jìn)行處理，方法包括用色譜純的甲醇或乙睛洗到?jīng)]有吸收;或樹(shù)脂用乙醇浸泡2天，丙酮浸泡2天，然后用常規(guī)的酸、堿洗，再用丙酮回流兩小時(shí)。

　　制備色譜柱該如何測(cè)柱效?業(yè)內(nèi)分析，可以選擇幾種物質(zhì)，苯、甲苯、萘、蒽等的衍生物上柱，流動(dòng)相一般用65-80%的甲醇\水，測(cè)定猴根據(jù)保留時(shí)間計(jì)算塔板數(shù)。不過(guò)，由于制備色譜的管路死體積一般比較大，很難得到和供應(yīng)商相同的柱效，建議在制備住開(kāi)始使用時(shí)在自己的色譜上測(cè)一下柱效，再定期檢測(cè)柱效進(jìn)行比較。

　　反相色譜分離后，如何快速?gòu)牧鲃?dòng)相中得到產(chǎn)品?可以考慮現(xiàn)在低溫下，減壓旋蒸出去其中的有機(jī)溶劑，然后用萃取的方法(如乙醇、氯仿萃取等)把產(chǎn)品萃取出來(lái)，然后再低溫再旋蒸，這樣就可以不將溫度升高而得到產(chǎn)品。

　　如果要直接蒸掉流動(dòng)相，水泵的真空度要注意(檢查氣密性)，否則蒸水會(huì)很慢。一般比較好的泵在60~70度即可蒸掉水，如果泵的真空度不好，可能需要80~90度才行，這樣容易暴沸，導(dǎo)致樣品損失，溫度太高也會(huì)引起物質(zhì)變性。